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【动物实验】-ripply1在斑马鱼早期胚胎背腹发育中的作用

  目的:探讨ripply1基因在斑马鱼背腹轴早期发育中的作用。

  方法:使用斑马鱼全包囊原位杂交技术,揭示ripply1基因在斑马鱼早期胚胎发育中的表达模式,并在胚胎1-细胞期使用显微注射技术注射ripply1 mRNA。 ,Ripply1及以上蛋白高度表达。观察胚胎背侧和腹部标记基因以及胚胎形态的变化。 Tol2转基因技术被用于构建由ribply1启动子驱动的GFP转基因鱼。

  结果:原位杂交的结果表明,在斑马鱼胃的早期胚胎屏蔽阶段,ribply1基因在胚胎屏蔽中特异性表达。高度表达ripply1后,胚泡囊胚期背标志基因的表达范围扩大,腹标志基因的表达减弱,受精后24小时,胚胎表现出严重的背表型:头部增大。但是,在某些情况下,腹部的蛋黄延伸变弱,尾巴的躯干和尾巴的面积减小,并形成了另一个单独的轴。产生的转基因鱼揭示了母体ripply1的表达,并且GFP驱动的转录起始位点上游1200个碱基可以模拟内源基因的表达模式。

  结论:Ripply1可能参与了斑马鱼胚胎的早期背腹轴。

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