大鼠心肌细胞损伤,miR-221 中国实验动物信息网 2021-09-24 1352

　　目的：探讨miR-221在过氧化氢（H2O2）诱导的大鼠心肌细胞（H9c2）损伤中的作用及机制。

　　方法：MTT法检测不同浓度H2O2对H9c2细胞的破坏作用，RT-PCR法检测miR-221的表达。将miR-221抑制剂和阴性对照通过Lipofectamine 2000转入H9c2心肌细胞，分4组进行实验：正常对照组、模型对照组（H2O2组）、阴性对照组（H2O2+阴性对照组）、抑制组。 （H2O2 + miR-221 抑制剂组）。 MTT法检测细胞活力，吖啶橙染色检测细胞凋亡，Bax，Bcl-2、Western blot检测10号染色体缺失的磷酸酶，Tensin同源基因蛋白（PTEN）和p蛋白激酶（AKT）的表达。

　　结果：0、25、50、100、200、400μmol/LH2O2对H9c2细胞活力的抑制作用逐渐增强，200μmol/LH2O2中度抑制细胞活力，作为后续诱导剂量使用。与正常对照组相比，模型组和阴性对照组中miR-221表达显着上调（Pu003c0.01），H9c2细胞活力降低（Pu003c0.01），细胞凋亡降低。率显着升高（Pu003c0.01），Bax和PTEN表达上调（Pu003c0.01），Bcl-2和p-AKT表达下调（Pu003c0.01）。与模型对照组和阴性对照组相比，抑制组miR-221的表达显着下调（Pu003c0.01），H9c2细胞活力增加（Pu003c0.01），凋亡率增加.显着下降(Pu003c0.01)。 Bax 和 PTEN 的表达下调（P\u003c0.01），Bcl-2 和 p-AKT 的表达上调（P\u003c0.01）。

　　结论：miR-221的低表达可能显着抑制H2O2诱导的H9c2心肌细胞的氧化应激损伤，与PTEN/AKT信号通路的调节相关。