动物造模,荧光定量检测 中国实验动物信息网 2021-11-25 1337

　　目的： 建立一种能在临床上快速、准确地检测大鼠疑似泰勒氏病毒（Theiler's-like virus of rats，TLV）的方法，采用TaqMan探针荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）技术，特异性针对TLV病毒核酸进行检测。

　　方法： 通过基因合成序列作为质粒标准品的模板，同时选择特异性的序列在3622~3729 nt处，设计一对引物和TaqMan性探针，优化反应体系及条件，进行qPCR扩增，从而建立TLV TaqMan探针qPCR方法，并对其灵敏度、稳定性和特异性进行评价。

　　结果： 建立的TLV qPCR检测方法，标准曲线线性关系良好，R2值可达到0.99，灵敏性*低能够检测到10个拷贝数/μL，对比普通PCR方法，高出其100倍；对其他常见大鼠病毒均无非特异反应；重复性良好，批内和批间变异系数均小于1%。

　　结论： 利用TaqMan探针建立快速检测TLV的荧光定量PCR方法，该方法具有操作简便、灵敏度高、特异性好等特点。