TALEN技术 中国实验动物信息网 2020-08-13 3364

　　科学家发现，通过TALEN技术可以得到miRNAs基因敲除的小鼠模型，成功解决了过去在小鼠中很难进行小基因（small genes，如miRNAs）和含有重复序列基因敲除的难题。

　　miRNAs是一类内生的、长约21-25nt的双链RNA分子，具有典型的发夹结构，可调节其他基因的表达，据推测，miRNAs调节着人类三分之一的基因。miRNAs存在多种形式，从*原始的pri-miRNA经过一次加工后成为pre-miRNA即microRNA前体，pre-miRNA再经过Dicer酶酶切后，成为成熟miRNA。miRNA通过与靶基因的mRNA特异结合，从而抑制转录后基因表达，在调控基因表达、细胞周期、生物体发育时序等方面起重要作用。

　　Hiroshi Asahara及其研究人员利用TALEN技术打靶一个基因沙漠区（gene desert）和miRNAs，得到miRNA 基因敲除的小鼠且成功率高。研究人员还证实，通过显微注射TALEN RNA引起的等位基因突变能够遗传至小鼠的下一代。同时该项研究显示，与miRNAs的成熟机制一致，只要利用TALEN在miRNA前体上打靶成熟miRNA之一的序列并引入突变，就会造成整个成熟miRNAs功能的敲除，这为研究miRNAs对基因的调控作用提供了有效的技术方法。