动物造模,肺成纤维 中国实验动物信息网 2022-05-26 1231

　　目的：探讨IL-27及其受体（WSX-1）对TGF-β1诱导的小鼠肺成纤维细胞增殖、转化及胶原合成作用。

　　方法：构建IL-27R/pCDNA3.1 过表达载体。实验分为6 个组：正常组，TGF-β1 组，IL-27 组，IL-27 受体组，IL-27+IL-27 受体组，TGF-β1+IL-27+IL-27 受体组。光学显微镜下观察细胞的生长状况，用MTT检测各处理组对肺成纤维细胞增殖的影响。RT-PCR 和Westernblotting 检测肌成纤维细胞标志物a-SMA以及Ⅰ和Ⅲ型胶原的表达，并用免疫荧光检测a-SMA蛋白的定位及表达情况。

　　结果：（1）IL-27和IL-27R都可以抑制肺成纤维细胞增殖；（2）TGF-β1促进肺成纤维细胞表达α-SMA增加，并促进肺成纤维细胞Ⅰ和Ⅲ型胶原合成；（3）IL-27及其受体可以抑制肺成纤维细胞α-SMA的表达，并减少肺成纤维细胞I和III型胶原的合成；（4）IL-27/IL-27R共同作用时，对肺成纤维细胞增殖转化没有影响。

　　结论：IL-27或IL-27受体可以抑制TGF-β1诱导的小鼠肺纤维化细胞增殖、转化和胶原的合成作用，但是IL-27与IL-27受体共同存在的情况下却不能发挥抑制作用，这可能是由于外源性的IL-27与IL-27受体的中和作用不能激活细胞相关信号。