动物造模,基因敲除 zi-bio 2024-02-28 2461

　　目的：利用显微注射技术注射敲除TXNIP基因的TALE MRNA获得TXNIP敲除小鼠。

　　方法：在线设计TXNIP敲除位点，构建栽粤蕴耘晕载体并在细胞水平验证剪切活性，体外转录TALENs成mRNA并通过显微注射技术注射到c5b7l/6j小鼠受精卵，对f0代小鼠进行DNA水平鉴定获得TXNIP敲除小鼠。

　　结果：在TXNIP第一外显子上设计了TALEN识别剪切位点，并在细胞水平验证具有剪切活性，注射mRNA到受精卵获得了4只敲除小鼠，其中2只TXNIP发生移码突变，成功制备了TXNIP敲除小鼠。